離心濃縮儀作為配有抗腐蝕化學隔膜泵的完整系統(tǒng)的一部分或是作為一個便于升級的基本配置,確保高效、平緩地對您的樣品(如DNA/RNA,蛋白質(zhì))進行真空濃縮。對于許多提供商業(yè)化高通量測序服務的實驗室,由于必須濃縮處理大量低濃度DNA樣品,是該款真空離心濃縮儀的“用武之地”。也許有人會考慮通過應用不同方法(如乙醇沉淀;反復濃縮以達到濃縮核酸的目的,但是這種操作既耗時且損失大量樣品,無法保障準確測序的要求而被此類實驗室挨棄。另外,濃縮干燥DNA樣品也要把握適度原則,否則樣品中濕度過低,DNA不易重溶,一樣會影響后續(xù)實驗的效果。
離心濃縮儀測試方法:
1.再濃縮DNA樣品
許多時候,當完成循環(huán)測序通過聚丙烯酰胺凝膠分離后,卻發(fā)現(xiàn)結(jié)果不盡如人意,我們首先需要考慮DNA樣品是否濃縮不足?除了通過比色分析濃度、通過將樣品溶入少量溶劑濃縮樣品外,推薦您使用5301真空離心濃縮儀再濃縮DNA樣品,通過加熱60℃與“功能1”命令,僅需30分鐘就可將150ulDNA水溶液濃縮至10ul,而且不影響DNA之后在測序中的反應。相同的參數(shù)條件也可用于測序中使用的引物濃縮。
對于比較敏感的樣品,我們不必機械地選擇溫度參數(shù),可以適當?shù)剡x擇相對低的溫度,只要相應延長離心濃縮的時間即可。
2.去除DNA樣品中的醇殘留
無法對重溶的DNA樣品進行標準的測序反應,可能是由于DNA樣品中存在醇污染,通過5301真空離心濃縮儀加熱60℃與“功能1”命令,4分鐘內(nèi)就可將DNA樣品中的醇殘留去除。
3.分裝酶
通過分別稱量分裝小量酶如RNase至微量檢測管,想來就是件費時費力的工作。為了在每個微量檢測管中加入1mg酶,先將100mg酯溶入1ml水中,在多道移液器的幫助下在每個微量檢測管中加入10ul酶溶液,接下來就是5301真空離心濃縮儀的強項,45℃與“功能”命令,5分鐘內(nèi)就可將酶溶液中的水份*蒸發(fā)。